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                            血清沉淀是否會影響細胞生長?如何避免?

                            發布時間: 2021-08-18  點擊次數: 1903次

                            血清沉淀是否會影響細胞生長?如何避免?

                            血清是細胞培養試劑中最基礎普遍的試劑之一,之前我們已經介紹過了有關特殊加工工藝血清的一些小知識(了解和認識胎牛血清,特殊加工工藝血清,您知道幾種?),那么今天我們將繼續了解有關血清沉淀與血清熱滅活的相關知識~

                            血清沉淀是否會影響細胞生長?如何避免?



                            血清沉淀

                            1. 血清沉淀是什么?  

                            血清中經常會出現肉眼可見的沉淀,其成分有多種類型,產生的原因有很多。主要有纖維蛋白(絮狀沉淀)、甲胎蛋白、脂蛋白、冷凝集素、玻粘連蛋白、磷酸鈣(顯微鏡下小黑點沉淀)、膽固醇等。

                            ●纖維蛋白(Fibrin)

                            血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產過程中,血清采集、過濾(3 次 0.1μm過濾)和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時血清中纖維蛋白原(Fibrinogen)處于溶解狀態。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發生凝集,形成肉眼可見的沉淀。


                            血清沉淀是否會影響細胞生長?如何避免?

                            ▲ 纖維蛋白沉淀圖


                            ●磷酸鈣(Calcium Phosphate)

                            這是一種常見的沉淀成分,通常會造成血清出現云霧狀渾濁。當血清在 37℃保存時,這種現象尤其明顯,在倒置顯微鏡下可觀察到小黑點的存在。這些小黑點在布朗運動的作用下四處游動,常被誤認為是微生物污染。

                            ●其他成分(Other)

                            血清中的其他成分也會形成沉淀,例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等。



                            2. 沉淀是如何形成的?          

                            造成沉淀的主要原因是溫度的改變、熱滅活、反復凍融、長期儲存于2-8℃或者室溫。



                            3. 血清沉淀會影響細胞培養嗎?

                            我們在出廠前都會對血清進行一系列質檢測試,確保血清質量達到嚴格標準。血清測試和細胞培養經驗也表明,其沉淀成分不會影響血清作為細胞培養添加物的表現。這一點得到了眾多用戶和其他血清供應商的肯定。解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發生凝集,形成肉眼可見的沉淀。

                            磷酸鈣顆粒經常會被當成微生物污染而引發不必要的擔憂。一般情況下,當操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時,常將其存放在 4℃冰箱中觀察,并考慮接下來是否繼續使用。但這樣會使沉淀進一步增多,反而會使血清更加渾濁,進而誤以為存在血清污染。并且,在倒置顯微鏡下,可在血清中觀察到小黑點(磷酸鈣顆粒的布朗運動),更容易使人誤以為存在微生物污染。

                            為防止這類誤解的產生,我們不建議用戶培養血清來驗證是否存在污染,而是將血清直接接種在細菌培養基上進行培養,以觀察是否有細菌的增殖。并且,進行革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直接確認是否存在微生物污染。

                            Zeta Life血清經過3次0.1μm過濾除菌,低內毒素,通過血紅蛋白測試合格,經美國農業部(USDA)認證。



                            4. 如何避免血清沉淀                

                            ●正確解凍

                            首先,應按照逐步解凍的方式正確解凍血清:從-20℃取出后,置于4℃冰箱緩慢解凍,最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或37℃水浴解凍,則非常容易產生沉淀。在解凍過程中,請注意,應時不時緩慢搖晃血清瓶,可減少沉淀的產生。為避免反復凍融,建議您將血清分裝使用。

                            ●使用和保存注意事項

                            血清沉淀很難預測和避免,出現沉淀后也無需擔憂,這并不會影響血清的品質。已知血清沉淀在以下條件下會有增多的可能:

                            1) 熱滅活;

                            2) 37℃培養;

                            3) 反復凍融;

                            4) 伽馬射線照射;

                            5) 2-8℃長期保存;

                            6) 長期保存于可自動化霜的冰箱中(溫度不穩定);

                            ●血清沉淀的形成機理多種多樣,具體的機理尚不十分明確。我們尚不能準確預測和控制血清沉淀的產生。目前市面上所有品牌的血清產品都存在沉淀現象,這一點可以在各品牌網站上關于沉淀問題的聲明上得到證實。


                            5. 有沉淀時如何處理?            

                            我們建議您采用2000rpm離心5分鐘,取上清使用就好,比過濾方便,不需要另外準備濾芯和針筒,且不容易污染。


                            總結建議

                            血清產品中出現沉淀屬于正?,F象,不會影響到血清的品質,對細胞培養也不會產生影響,大家可以放心使用,若不立即使用,血清應保存在-20℃以下。




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                            胎牛血清-澳洲血源

                            Z7010FBS-500

                            500ml*1

                            胎牛血清-法國血源

                            Z7186FBS-500

                            500ml*10

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                            Z7187FBS-500

                            500ml*10


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                            安培生物,一個致力成為推動生命科學進步的值得信賴合作者。




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