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                            qPCR中的絕對定量是什么?

                            發布時間: 2021-10-14  點擊次數: 4666次

                            絕對定量目的是使用PCR測定目的基因在樣本中的數量,即拷貝數。


                            在絕對定量中,想要得到目的基因的拷貝數,需要制作標準曲線圖。制作標準曲線圖需要將標準品稀釋至不同濃度,作為模板進行PCR。標準品是已知濃度的模板。


                            結束PCR后,以測得的CT值為縱坐標,標準品濃度的對數值為橫坐標,繪制標準曲線圖。


                            對待測樣品的目的基因進行檢測時,只需要將得到的CT值代入標準曲線圖,即可計算出樣品中目的基因的拷貝數。


                            需要注意的是:

                            1、標準品必須來源可靠、濃度已知

                            2、標準品要和待測樣品要同時在儀器中擴增

                            3、只能根據標準品覆蓋的濃度范圍,進行樣品濃度的推測

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