銷售熱線

                          19126518388
                          • 技術文章ARTICLE

                            您當前的位置:首頁 > 技術文章 > ibidi 載玻片|優化活細胞培養

                            ibidi 載玻片|優化活細胞培養

                            發布時間: 2024-01-18  點擊次數: 1110次

                            簡介:

                            免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。傳統實驗方法用小玻片,先泡酸、再晾干、再 coating、再種細胞、染色、封片成像。

                            本文章使用新方法,我們將描述在通道載玻片內培養大鼠成纖維細胞(Rat1)的單個實驗案例。然后,我們用AlexaFluor®488鬼筆環肽染色F-肌動蛋白細胞骨架,并用DAPI對細胞核進行復染。

                            實驗步驟:

                            培養,固定,染色,成像


                            培養:


                            1.在無菌條件下打開ibidi μ-Slide并將其放在μ-Slide架(80003)上。將Rat1細胞懸浮液加入通道中。

                            2.用提供的蓋子輕輕地蓋住儲液器??梢圆糠株P閉它們。


                            3.將架子放入培養箱(37°C; 5%CO2)中,讓細胞附著(60分鐘)。然后用無細胞培養基填充兩個儲庫。


                            4.培養過夜。


                            固定細胞:

                            1.通過使用細胞培養抽吸裝置或移液管從儲庫中吸出整個培養基。用Dulbecco's PBS洗滌細胞,緩慢地將液體施加到一個空的儲液器中,并從對面的儲液器中吸出。

                            2.通過在PBS中使用3.7%多聚甲醛以相同的方法固定細胞。從通道的另一側移除儲液器的液體并等待10分鐘。

                            洗滌封閉:

                            1.用PBS洗滌細胞。

                            2.在PBS中使用0.1%Triton®X-100溶液通透3-5分鐘。


                            3.在PBS溶液中施加μl的1%BSA 溶液封閉20分鐘。


                            4.用PBS洗滌細胞


                            染色鏡檢

                            1.從通道中清除所有液體。從通道中吸出液體后,不要讓通道干燥。

                            2.用AlexaFluor®488鬼筆環肽(1Unit+500μl PBS+ 1%BSA,InvitrogenCorp.)在室溫下培養20分鐘。

                            3.用PBS洗滌細胞并清空通道。


                            4.施用DAPI(0.1μg/ ml,Sigma-Aldrich)3-5分鐘。


                            5.用PBS洗滌細胞并除去所有液體。用滴管瓶注入 Ibidi封片油。用提供的蓋子蓋住儲液器。μ-Slide可以存儲大約4周。


                            6.在熒光顯微鏡下選擇適當的濾鏡,也可以使用浸油觀察細胞。



                            優點:

                            1.高分辨率成像

                              ibidi載玻片非常適合寬場熒光、共焦成像、FRAP、FRET、FLIM和相差成像。

                            2.操作快速、簡單

                              一體式腔室簡化了您的免疫熒光實驗流程。

                            3.經濟高效的實驗

                              僅需少量細胞和少量試劑。

                              深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、壹流的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業??偛吭O在廣東,服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司,旨在為生命科學的發展提供壹流的產品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經科學等領域的產品供應線,在各個領域內向用戶提供世界前沿水平和質量穩定的產品,安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等優質客戶提供優質的產品、技術支持與服務。






                          產品中心 Products
                          图片小说亚洲中文字幕|国产真人一级a爱做片无码|国产91最新欧美在线|国产日韩欧美综合